细胞转染概述及应用
细胞转染是将外源基因（如DNA、RNA等）通过各种化学、生物或物理方法导入真核细胞的一项技术。这一技术在生物医学研究中发挥了重要作用，并广泛应用于多个领域：

■ 研究基因功能：通过导入特定的研究目标基因，实现其过表达，从而研究在细胞中高表达对细胞功能的影响。另一方面，利用siRNA或shRNA降低目标基因的表达，探索基因缺失对细胞功能的影响。

■ 蛋白质表达生产：通过转染编码目标蛋白基因以进行蛋白质的表达和纯化，同时也能通过融合荧光蛋白来研究目标蛋白在细胞内的分布和定位。

■ 细胞工程：通过转染和筛选获得能稳定表达外源基因的细胞系，构建稳定转染细胞株。

■ 药物筛选与毒性测试：转染特定基因以验证药物靶点的有效性，并通过高通量筛选寻找潜在药物。

■ 基因治疗：导入或修复基因以治疗某些遗传疾病，还可以转染编码抗原基因以进行疫苗研发。

细胞转染分类

根据导入的核酸在宿主细胞中的存在时间的长短，细胞转染可分为瞬转和稳转：

1. 瞬转：外源基因虽然能表达，但不会整合入宿主细胞的基因组，随着细胞分裂逐渐丢失。

2. 稳转：外源基因能够整合到细胞基因组中，随细胞分裂持续表达，确保后代细胞同样表达外源基因。

这两者的区别在于目的不同、稳定性不同、方法不同及转染后筛选过程的不同：

■ 目的不同：瞬转用于短时间内获得高水平基因表达，而稳转用于获取稳定表达目标基因的细胞株。

■ 稳定性不同：瞬时转染的基因稳定性较差，而稳转因经过筛选、整合到染色体中而稳定性较好。

■ 方法不同：瞬转通常采用脂质体转染，而稳转一般偏向病毒转染或电转等方法。

■ 筛选过程：瞬转通常不需要筛选，而稳转需经过筛选以挑选出目的基因整合入染色体的细胞。

细胞转染的技术方法

按方法可分为物理介导法、化学介导法和生物介导法：

1. 物理介导法：如电穿孔法和显微注射法，利用物理方法直接将外源核酸导入细胞内，效率高但细胞损伤大，存活率低。

2. 化学介导法：利用PEI、脂质体等化学物质改变细胞膜的性质，以促进基因转移，操作简单但多无法长期稳定表达外源基因。

3. 生物介导法：使用病毒作为载体，将外源基因包装后导入细胞，实现长期稳定表达，适用于体内外的高效基因转移，操作相对繁琐，周期较长。

综上所述，细胞转染的方法多种多样，选择合适的方法取决于实验需求、实验室条件、细胞类型及转染效率等因素。在目前的研究中，许多实验室主要采用化学介导中的脂质体转染和生物介导中的慢病毒转染法。尽管质粒转染操作简单，但某些细胞系的转染效率较低，而尊龙凯时的病毒转染方法具有稳定表达和广泛宿主范围的优势，尤其在对原代细胞和干细胞的转染中具有较高的效率，适用于体内实验和动物模型研究。

尊龙凯时提供多种细胞转染服务，包括慢病毒转染绿色荧光蛋白（ZsGreen）、红色荧光蛋白（mCherry、RFP）、化学发光LUC以及SV40永生化转染，总计近40种稳定转染细胞系。能够根据特定需求提供定制化的慢病毒转染服务。

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